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Konfigurierbare Panels & Premixed-Kits
Unser breites Angebot enthält Multiplex-Panels, für die Sie die Analyten auswählen können, die am besten für Ihre Anwendung geeignet sind. Unter einem separaten Register können Sie das Premixed-Cytokin-Format oder ein Singleplex-Kit wählen.
Kits für die zelluläre Signaltransduktion & MAPmates™
Wählen Sie gebrauchsfertige Kits zur Erforschung gesamter Signalwege oder Prozesse. Oder konfigurieren Sie Ihre eigenen Kits mit Singleplex MAPmates™.
Die folgenden MAPmates™ sollten nicht zusammen analysiert werden: -MAPmates™, die einen unterschiedlichen Assaypuffer erfordern. -Phosphospezifische und MAPmate™ Gesamtkombinationen wie Gesamt-GSK3β und Gesamt-GSK3β (Ser 9). -PanTyr und locusspezifische MAPmates™, z.B. Phospho-EGF-Rezeptor und Phospho-STAT1 (Tyr701). -Mehr als 1 Phospho-MAPmate™ für ein einziges Target (Akt, STAT3). -GAPDH und β-Tubulin können nicht mit Kits oder MAPmates™, die panTyr enthalten, analysiert werden.
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Custom Premix Selecting "Custom Premix" option means that all of the beads you have chosen will be premixed in manufacturing before the kit is sent to you.
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96-Well Plate
Menge
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Weitere Reagenzien hinzufügen (MAPmates erfordern die Verwendung eines Puffer- und Detektionskits)
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48-602MAG
Buffer Detection Kit for Magnetic Beads
1 Kit
Platzsparende Option Kunden, die mehrere Kits kaufen, können ihre Multiplex-Assaykomponenten in Kunststoffbeuteln anstelle von Packungen erhalten, um eine kompaktere Lagerung zu ermöglichen.
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Assay kit useful for the quantitative measurement of lecithin:cholesterol acyltransferase activity (LCAT) in human plasma. LCAT mediates the formation of cholesteryl esters in human plasma by transferring an acyl chain from the sn-2 position of phosphatidylcholine to cholesterol.
The non-hydrolyzed LCAT Substrate fluoresces at 470 nm. Upon hydrolysis by LCAT, a monomer is released from the LCAT Substrate that fluoresces at 390 nm. LCAT activity is assessed as a change in 470/390 emission intensity.
Normal human plasma is assayed according to the Detailed Protocol above. Over time the 470/390 ration decreases, indicating LCAT activity in the sample.
Materials Required but Not Delivered
•LCAT Assay Buffer (150 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl, 4 mM 2-mercaptoethanol, 1 mM EDTA, 7.4) •READ Reagent Reconstitution Buffer (150 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 7.4)
References
Product Information
Detection method
Fluorometric
Form
100 Tests
Kit contains
LCAT Substrate, READ Reagent, and a user protocol.
In case of contact with eyes, rinse immediately with plenty of water and seek medical advice.
Product Usage Statements
Intended use
The Calbiochem® LCAT Activity Assay Kit, Fluorometric is intended for the quantitative measurement of lecithin:cholesterol acyltransferase activity (LCAT) in normal human plasma. This kit allows the quantitation of fold of increase or decrease of enzymatic activity among samples, this kit also allows the quantitation of the % change of 470/390 ratio with time, which can be used to define LCAT enzymatic activity. This kit does not allow the measurement of substrate concentration or the amount of hydrolyzed substrate.
Storage and Shipping Information
Ship Code
Blue Ice Only
Toxicity
Irritant
Storage
Multiple storage requirements
Storage Conditions
Upon arrival store the LCAT Substrate at -20°C and the READ Reagent at 4°C.
Protect from Light
Protect from light
Do not freeze
Ok to freeze
Packaging Information
Transport Information
Supplemental Information
Kit contains
LCAT Substrate, READ Reagent, and a user protocol.
Upon arrival store the LCAT Substrate at -20°C and the READ Reagent at 4°C.
Intended use
The Calbiochem® LCAT Activity Assay Kit, Fluorometric is intended for the quantitative measurement of lecithin:cholesterol acyltransferase activity (LCAT) in normal human plasma. This kit allows the quantitation of fold of increase or decrease of enzymatic activity among samples, this kit also allows the quantitation of the % change of 470/390 ratio with time, which can be used to define LCAT enzymatic activity. This kit does not allow the measurement of substrate concentration or the amount of hydrolyzed substrate.
Principles of the assay
LCAT mediates the formation of cholesteryl esters in human plasma by transferring an acyl chain from the sn-2 position of phosphatidylcholine to cholesterol. Using the LCAT Activity Assay, Fluorometric, human plasma samples are incubated with LCAT Substrate, a fluorescent substrate that emits fluorescence at 470 nm. When the substrate is hydrolyzed by LCAT, a monomer is released that emits fluorescence at 390 nm. The LCAT activity is assessed as a change in 470/390 emission intensity.
Figure 1: Assay Principle
The non-hydrolyzed LCAT Substrate fluoresces at 470 nm. Upon hydrolysis by LCAT, a monomer is released from the LCAT Substrate that fluoresces at 390 nm. LCAT activity is assessed as a change in 470/390 emission intensity.
•LCAT Assay Buffer (150 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl, 4 mM 2-mercaptoethanol, 1 mM EDTA, 7.4) •READ Reagent Reconstitution Buffer (150 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 7.4)
Reagent preparation
•READ Reagent: reconstitute the vial of READ Reagent with 29.7 ml READ Reagent Reconstitution Buffer.
Detailed protocol
1. Mix 1 µl LCAT Substrate 200 µl LCAT Assay Buffer with sample containing LCAT (e.g., 3-5 µl normal human plasma) and incubate for 4-8 h at 37°C. 2. Add 100 µl of the mixture in step 1 to 300 µl READ Reagent and vortex. Read the fluorescence at an excitation wavelength of 340 nm and an emission wavelength of 390 nm and 470 nm. DO NOT incubate the samples in the presence of READ Reagent, as this will inactivate the LCAT in the sample.
NOTE: The emission intensities at 390 nm and 470 nm represent the emission of the substrate hydrolyzed (390 nm) and not hydrolyzed (470 nm). In the presence of LCAT, a ratio of the two emission intensities (470/390) will indicate an increase in concentration of the monomer, which emits at 390 nm, and the simultaneous decrease in concentration of the non-hydrolyzed LCAT Substrate, which emits at 470 nm.
Example data
Figure 2: Example Data
Normal human plasma is assayed according to the Detailed Protocol above. Over time the 470/390 ration decreases, indicating LCAT activity in the sample.
Registered Trademarks
Calbiochem® is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt. Interactive Pathways™ is a trademark of Merck KGaA, Darmstadt.