モンタージュ（Montage） 抗体精製キット
Designed for fast and easy antibody purification from serum, ascites or cell culture supernatants.
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概要
仕様
ご注文情報
Documentation
参考資料
| 参考資料の概要 |
|---|
| Antibody Purification with Affinity Spin Columns Kavonian, Mark,BioScience Technology, July 2003 BioScience Technology, July 2003 2003 |
| Considerations During Development of a Protein A-Based Antibody Purification Process Iyer et al.,Biopharm, January 2002, pp 14-20 Biopharm, January 2002, pp 14-20 2002 |
| A sensitive enzyme linked immunoadsorbent assay (ELISA) for the detection of staphylococcal prtein A (SpA) present as a trace contaminant of murine immunoglobulins purified on immobilized protein A Miguel A.J. Godfrey, Piotr Kwasowski, Roland Clift and Vincent Marks Journal of Immunological Methods, 149(1992) 21-27, 1992 1992 |
FAQ（よくある質問と回答）
| 質問 | 回答 |
|---|---|
| What is the shelf life of the Prosep A and Prosep G spin columns? | The spin columns/media are under warranty for 2 years provided they are stored at 2-8 C. |
| Do I need to filter the buffers provided with the Montage Antibody Purification kit? | The buffers supplied with the kit are pre-filtered for immediate use. |
| Do I need to pre-filter my sample before loading it onto a Prosep A or ProSep G spin column? | All samples must be filtered through a 0.22 mm filter immediately before loading the sample onto the column. We recommend using a Steriflip-GP 0.22 mm filter. |
| What is the binding capacity of the Prosep A spin column? | Using the Prosep A spin columns we have been able to bind >20 mg of Rabbit IgG. |
| What is the maximum volume I can load onto the Prosep A and Prosep G spin columns? | You can load up to 20 ml in a Prosep A or Prosep G sping column for a swinging bucket rotor and up to 10 ml for a fixed angle rotor. We recommend that you spin it in a swinging bucket rotor. |
| Why do you suggest that the Prosep A spin columns be spun at 100-150 xg for 20 minutes? | The low speed, twenty minute centrifugation maximizes IgG / resin contact which increases IgG binding efficiency. |
| Can I use a fixed angle rotor or a swinging bucket rotor with the Prosep A and Prosep G spin columns? | Swing bucket rotors are recommended because they provide uniform flow through the resin. For optimal performance with a fixed angle rotor, ensure that the orientation of the Prosep A spin coulmn is the same for all steps. Also please note that the maximum sample loading volume for a fixed angle rotor is ten ml versus twenty ml with a swinging bucket rotor. |
| What is the minimum elution volume for the Prosep A and Prosep G spin columns? | We suggest 10 ml. Smaller volumes can be used but they may result in incomplete IgG recovery. If you use a smaller volume the neutralization buffer volume should also be adjusted accordingly. |
| How do I regenerate the Prosep A spin columns? | We recommend that you wash the plugs with 10 ml of Elution Buffer B2 by centrifuging at 500 xg got 5 minutes. re-equilibrate the media with 5 ml of Binding Buffer A by centrifuging the spin column at 500 xg for 2 minutes. Proceed to step 1 of the antibody purification protocol for immediate re-use or store the plugs without their end caps in 5 ml of Binding Buffer a in a 15 ml screw-capped tube for future use. |
| Can I autoclave the Prosep A and Prosep G spin columns? | The Prosep A and Prosep G spin columns cannot be autoclaved. |
関連製品＆アプリケーション
製品ファミリー
ステリフリップ（Steriflip）フィルターユニットNo sample transfer, just connect your tube and filter詳細はこちら >> |
アミコンウルトラ（Amicon Ultra）-15 遠心式フィルターユニットProvide both ultra-fast spin times and ultra-high recoveries詳細はこちら >> |
イモビロン（Immobilon） トランスファーメンブレンシリーズImmobilon® PVDF membranes are the ideal transfer membranes for protein blotting applications.詳細はこちら >> |
関連製品: Application Facete
| Protein Purification |
| Dialysis and Filtration |
関連製品: Brand Facete
| Montage® |
| ProSep® |
カテゴリー
モンタージュ（Montage）抗体精製キットは血清、腹水、細胞培養の上清から迅速かつ容易に精製を行うことができるキットです。このキットには高性能のPROSEP-A担体またはPROSEP-G担体を充填したスピンカラムが付属しています。ポンプを使ってセットアップする必要はありません。充填用のカラムも不要です。遠心操作でわずか60分で最大10mLの精製が可能です。
利便性を最大限追求するため、モンタージュキットには至適バッファー、前ろ過用のステリフリップ（Steriflip）ユニット類、精製抗体の脱塩・濃縮用のアミコンウルトラ（Amicon Ultra）遠心式ユニット類が付属しています。従来の重力流を用いる方法とは異なり遠心により精製するため、プロトコールが非常に手軽に簡便に行えます。
スピンカラムは結合能や特異性を損なうことなく最大10回まで再生可能です。通常、収量は20 mgを上回ります。
性能
スピンカラムの再使用
)
再生PROSEP-Gスピンカラムを用いて正常血清からヒトIgGを10回精製した。
モノクローナル抗体の精製
)
PROSEP-Aスピンカラムを用いて腹水からモノクローナルマウスIgGを精製した（レーン1: 未精製の腹水、レーン2: 腹水のフロースルー、レーン3: 洗浄液のフロースルー、レーン4: 5 µgの精製抗体）。Exalpha Biologicals社のご厚意により転載。
| プロテインAおよびプロテインGの結合親和性 | ||||||
| Protein | A | G | Protein | A | G | |
| Human IgG1 | ++ | ++ | Rat IgM | + /-- | - | |
| Human IgG2 | ++ | ++ | Rabbit IgG | ++ | ++ | |
| Human IgG3 | -- | ++ | Hamster IgG | + | ++ | |
| Human IgG4 | ++ | ++ | Guinea Pig IgG | ++ | + | |
| Human IgA | + | -- | Bovine IgG | + | + | |
| Human IgD | + | -- | Sheep IgG | + / -- | + | |
| Human IgE | + | -- | Goat IgG | + /-- | + | |
| Human IgM | + | -- | Pig IgG | ++ | ++ | |
| Mouse IgG1 | + | + | Chicken IgG | -- | + /-- | |
| Mouse IgG2a | ++ | ++ | Fragments | |||
| Mouse IgG2b | ++ | ++ | Human Fab | + | + | |
| Mouse IgG3 | + | ++ | Human F(ab')2 | + | + /-- | |
| Mouse IgM | + /-- | -- | Human ScFv | + | -- | |
| Rat IgG | ++ | ++ | Human Fc | + | -- | |
| Rat IgG1 | + /-- | + | Human K | -- | -- | |
| Rat IgG2a | + /-- | ++ | Human | -- | + | |
| Rat IgG2b | + /-- | + | ||||
| Rat IgG2c | + /-- | + | ||||
| Legend: ++ = Strong affinity; + = Moderate/slight affinity; +/-- = Requires evaluation; -- = No affinity | ||||||
| キットの構成内容 | 本キットの構成内容は、PROSEP-AまたはPROSEP-G担体を充填したモンタージュスピンカラム（2本）、至適バッファー、精製用ステリフリップフィルターユニット、精製抗体の脱塩・濃縮用のアミコンウルトラ遠心式ユニットです。 | |
| 支持担体 | 多孔質ガラス | |
| 担体の粒子径 | 75 µm–125 µm | |
| 担体のベッド容積 | 1.6 mL | |
| 結合能 | ||
| プロテインA | >20 mg ウサギ IgG | |
| プロテイン G | >10 mg ウサギ IgG | |
| pH範囲 | pH2 – pH9 | |
| 容量 | 20 mL (maximum in swinging bucket rotor) | |
| 保存温度 | ||
| エンドキャップの色 | ||
| プロテインA | 赤 | |
| プロテインG | 黄 | |