ChIPAb+ジメチル-ヒストンH3（Lys9） - ChIP検証済み抗体およびプライマーセット

すべてのChIPAb+抗体は、すべてのロットについて毎回個別にクロマチン沈降がバリデーションされます。各ChIPAb+抗体セットには、遺伝子座に固有のコンテキストでIP結果を生物学的にバリデーションするためのコントロールプライマー（qPCRですべてのロットがテスト済み）が含まれています。qPCRプロトコルとプライマー配列が提供されるため、研究者は各自のクロマチンコンテキストでメルクの抗体を使用する際に、ChIPプロトコルをバリデーションできます。各セットには、ChIP反応の特異性を確保するためのネガティブコントロール抗体も含まれています。
ChIPAb+ジメチルヒストンH3（Lys9）セットには、抗ジメチルヒストンH3（Lys9）抗体、ネガティブコントロール抗体（精製マウスLys9）、およびヒトβ-グロビン遺伝子のプロモーター内の110塩基対領域を増幅するqPCRプライマーが含まれています。ジメチルヒストンH3（Lys9）とネガティブコントロール抗体は拡張性のある「ChIPごと」の反応サイズで供給され、ジメチルヒストンH3（Lys9）関連クロマチンの沈降を機能的にバリデーションするために使用できます。

約17 kDaのジメチルヒストンH3

エピトープ：a.a. 1-18

ジメチルヒストンH3（Lys9）精製抗体は、ヒストンH3のアミノ酸1-18に相当する合成ペプチド（Lys9でジメチル化されている）に対して作成されています。

このChIPAb+ ジメチル-ヒストンH3（Lys9）-ChIP検証済み抗体／プライマーセットには、便宜のため抗体、特異的なコントロールPCRプライマーが含まれています。

クロマチン免疫沈降：
HeLa細胞（1 x 10⁶個相当量／IP）から調製した超音波処理クロマチンに対し、2 µgの正常マウスIgGまたは抗ジメチルヒストンH3（Lys9）抗体およびMagna ChIP G（カタログ番号：17-611）キットを用いてクロマチン免疫沈降を行いました。 ジメチルヒストンH3（Lys9）関連DNA断片が正常に免疫沈降することを、β-グロブリンChIPプライマーとコントロールプライマーを用いたqPCRによって検証しました（図を参照）。 データは、各アンプリコンおよびChIPサンプルについて、使用したクロマチンに対する各IPサンプルの使用割合として示します。
実験の詳細は、EZ-Magna G ChIP（カタログ番号：17-408）またはEZ-ChIP（カタログ番号：17-371）プロトコルを参照してください。

ドットブロット分析：さまざまな修飾を持つヒストンペプチドを含むAbsurance Histone H3 Antibody Specificity Array（カタログ番号：16-667）およびAbsurance Histone H2A, H2B, H4 Antibody Specificity Array（カタログ番号：16-665）を、2.0 ug/mL（1:500）希釈で抗ジメチルH3（Lys9）で標識しました。 タンパク質を、HRP標識したロバ抗マウスIgGおよび化学発光検出システムを用いて可視化しました。

ウェスタンブロッティング：
リコンビナントヒストンH3（レーン1）およびHeLa酸抽出物（レーン2）を、電気泳動で分離し、PVDFメンブレンに転写し、抗ジメチルヒストンH3（Lys9）、クローンCMA307（0.1 μg/mL）で標識しました。HRP標識したヤギ抗マウス二次抗体と化学発光検出システムを用いてタンパク質を可視化しました。

マルチプレックス：
この抗体は、Lys9でジメチル化されたヒストンH3をLuminexアッセイで特異的に認識します。

ELISA：この抗体はELISAに適していることが、外部のラボによって示されています。

免疫細胞染色：この抗体は免疫細胞染色に適していることが、外部のラボによって示されています。

免疫沈降：この抗体は免疫沈降に適していることが、外部のラボによって示されています。

研究のカテゴリー
エピジェネティクス・核内機能分子

研究のサブカテゴリー
クロマチン生物学

このペプチド配列は、広範囲の動植物種において同一です。

リジン9でジメチル化されたMr 17 kDaのヒストンH3を認識します。

1キットあたり25アッセイ、クロマチン免疫沈降1回あたり約2 μg

フォーマット：精製

抗ジメチルヒストンH3（Lys9）（マウスモノクローナルIgG1қ、クローンCMA307）。0.05%アジ化ナトリウムを含有する50 μLのPBS中にプロテインG精製抗体50 μgを含むバイアル1本。 －20℃で保存してください。

正常マウスIgG。0.1%アジ化ナトリウムを含有する25 μLの保存緩衝液中に精製マウスIgG 25 μgを含むバイアル2本。－20℃で保存してください。

ChIPプライマーB-グロビン。ヒトβ-グロビンに特異的な5 μMの各プライマーを75 μL含むバイアル1本。
－20℃で保存してください。
フォワード：AGG ACA GGT ACG GCT GTC ATC
リバース：TTT ATG CCC AGC CCT GGC TC

－20℃で受領日から1年間安定です。
最初に解凍したときに分注し、凍結・融解サイクルを避けてください。

クロマチン免疫沈降：
HeLa細胞（1 x 10⁶個相当量／IP）から調製した超音波処理クロマチンに対し、2 µgの正常マウスIgGまたは抗ジメチルヒストンH3（Lys9）抗体およびMagna ChIP G（カタログ番号：17-611）キットを用いてクロマチン免疫沈降を行いました。 ジメチルヒストンH3（Lys9）関連DNA断片が正常に免疫沈降することを、ChIPプライマーB-グロビンを用いたqPCRで確認しました（図参照）。
実験の詳細は、EZ-Magna G ChIP（カタログ番号：17-409）またはEZ-ChIP（カタログ番号：17-371）プロトコルを参照してください。

コントロール
ネガティブコントロールマウスIgG抗体およびヒトβグロビンプロモーターに特異的なコントロールプライマーを含む。

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

メルクのカタログまたは製品に添付されたメルクのその他の文書に記載されていない場合、メルクの製品は研究用途のみを目的としているため、他のいかなる目的にも使用することはできません。このような目的としては、未承認の商業用途、in vitroの診断用途、ex vivoあるいはin vivoの治療用途、またはヒトあるいは動物へのあらゆる種類の消費あるいは適用などがありますが、これらに限定されません。