Anti-phospho-Histone H3 (Thr3) Antibody

ヒストンH3.1t（UniProt：Q16695、別名：H3/t、H3t、H3/g）は、ヒトHIST3H3（別名：H3FT）遺伝子（Gene ID：8290）によりコードされています。ヒストンは、真核生物のクロマチンのヌクレオソーム構造の主体となる、高度に保存された塩基性核タンパク質です。ヒストンは、転写調節、DNA修復、DNA複製、および染色体安定性において中心的な役割を果たしています。4種類のコアヒストン（H2A、H2B、H3、H4）各2分子が八量体を形成し、その周りをDNAがヌクレオソームと称する反復単位となって巻きついているため、DNAを鋳型として必要とする細胞機構にDNAは近寄れません。ヒストンH3は、コアの球状ドメインと長いN末端尾部を特徴とします。N末端尾部は球状ヌクレオソームから突き出ており、細胞プロセスに影響を及ぼす数種のエピジェネティックな修飾を受ける可能性があります。ヒストンのN末端は、リン酸化、アセチル化、メチル化などの翻訳後修飾を受け、下流の調節因子を動員して、クロマチン構造に影響を与え、転写の重要な決定因子となります。ヒストンH3は、ヒストンアセチルトランスフェラーゼにより、ヒストン尾部のいくつかのリジン残基がアセチル化されることがあります。アセチル化は一般に転写活性と関連しており、リジン残基とアルギニン残基のメチル化は、修飾された残基によって、活性化または抑制のどちらかになります。ヒストンH3のトリメチル化は、最もよく研究されているエピジェネティックなマーカーの1つです。H3K4me3の修飾は一貫して転写開始部位で起こると報告されており、H3K4me3ドメインは着床前発生と、内部細胞塊から胚性幹細胞を誘導したり栄養外胚葉から栄養膜幹細胞を誘導したりする過程での、転写活性増加と細胞識別増強に関連します。 ヒストンH3は細胞分裂前期にヒストンH3関連プロテインキナーゼ（HASPIN）によってトレオニン4がリン酸化され（H3T3ph）、分裂後期にオーロラキナーゼBによって脱リン酸化され、セリン11がリン酸化されます（H3S10ph）。これは、有糸分裂と減数分裂における染色体の凝縮と細胞周期の進行に不可欠です。（参考文献：Sharifi-Zarchi, A., et al. (2017).BMS Genomics.18; Article 964; Liu, X., et al. (2016).Nature.537(7621); 558-562）。

実測値：約17 kDa、算出値：15.51 kDa。一部のライセートでは、特性が明らかになっていないバンドが認められることがあります。

ヒトヒストンH3のリン酸化トレオニン3周囲の13のアミノ酸に相当するKLH結合直鎖ペプチド

品質管理試験

コルセミド処理したHeLa細胞からの酸抽出物でウェスタンブロッティングにより評価されています。ウェスタンブロッティング：希釈倍率1:5,000で使用、コルセミド処理（50 ng/mLで一晩）したHeLa細胞の酸抽出物中のリン酸化ヒストンH3（Thr3）は検出しましたが、リコンビナントヒストンH3タンパク質は検出しませんでした。


テスト済みの用途ペプチド阻害アッセイ：コルセミド処理（50 ng/mLで一晩）したHeLa細胞からの酸抽出物中の標的バンドの検出は、免疫原のリン酸化ペプチドで事前ブロックすることによって阻止されましたが、非リン酸化ヒストンH3ペプチドでは阻止されませんでした：希釈倍率1:500で使用、NIH3T3細胞中のリン酸化ヒストンH3（Thr3）を検出できます。最適なワーキング希釈倍率や実験条件は、サンプルごとに異なる可能性がありますので、予備実験を経てご自身で決定してください。

このウサギポリクローナル抗体は、トレオニン3でリン酸化されたヒストンH3を検出します。

免疫除去ウサギ血清、0.05%アジ化ナトリウム、30%グリセロール添加

免疫除去処理済み

フォーマット：未精製

-10°C～-25°Cで保存してください。 取扱いに関する推奨事項：受領時は、キャップを開ける前に、バイアルを遠心し、溶液を穏やかに混合してください。微小遠心管に分注してから、-20°Cで保存してください。凍結融解を繰り返さないでください。IgGに損傷を与える、または製品性能に影響を及ぼすおそれがあります。

コントロール
コルセミド処理HeLa細胞由来の酸抽出物

分裂期HeLa細胞から酸抽出したタンパク質でイムノブロッティングにより日常的に評価されています。

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