抗pan-ADPリボース結合試薬

カタログ番号：MABE1016、抗pan-ADPリボース結合試薬は、ウサギFcタグと融合させたHisタグ付きリコンビナントタンパク質であり、E. coliのRosetta (DE3)pLysS株で発現させ精製しています（カタログ番号：70956）。抗pan-ADPリボース結合試薬は、抗体をベースとしたウェスタンブロットおよびドットブロット分析と同様な方法でメンブレン上のモノおよびポリADPリボシル化タンパク質のアフィニティ検出を行う際に有用です。ウサギFcタグにより、コンジュゲートした抗ウサギ二次抗体との結合を可視化できます。Fcタグにより、アフィニティープルダウン法のために、抗pan-ADPリボース結合試薬をプロテインAレジンに捕捉することもできます。

標的タンパク質とADPリボシル化の程度によって異なります。

ドットブロット特異性分析：この試薬は、リコンビナントPARP3タンパク質のモノ（ADPR）、ならびにリコンビナントPARP1タンパク質のモノ（ADPR）およびポリ（ADPR）を検出しました（Lee Kraus, University of Texas Southwestern Medical Center）。

免疫沈降：抗pan-ADPリボース結合試薬の代表的なロットは、核抽出物のADPリボシル化タンパク質を免疫沈降させました（Lee Kraus, University of Texas Southwestern）。

ウェスタンブロッティング：代表的なロットは、NAD+またはさまざまなNAD+アナログの存在下で、PARP1/2/3および変異体の自己ADPリボシル化活性を検出しました（Gibson, B.A., et al. (2016). Science. 353(6294):45-50）。

ウェスタンブロッティング：代表的なロットは、無細胞酵素反応においてPARP1触媒によるNELF-E ADPリボシル化、ならびにHEK293T細胞において外因的に発現させたFLAGタグ付きNELF-EのADPリボシル化を検出しました。PARP阻害剤PJ34またはP-TEFb/CDK9阻害剤であるflavopiridolの投与により、細胞のNELF-E ADPリボシル化レベルが低下しました（Gibson, B.A., et al. (2016). Science. 353(6294):45-50）。

抗poly-ADPリボース結合試薬は、ウェスタンブロッティング、免疫細胞染色、ドットブロット用の、モノおよびポリADPリボースに選択的に結合する試薬です。

研究カテゴリー
エピジェネティクス・核内機能分子

研究サブカテゴリー
一般的な翻訳後修飾

ポリ（ADP-リボース）およびモノ（ADP-リボース）

Ni-NTAアガロース

Ni-NTAアガロースによりE. coliから精製しました。10 mM Tris pH 7.5、0.2 M NaCl、10%グリセロール、10 mMイミダゾール、1 mM PMSF、1 mM β-メルカプトエタノール、10%グリセロールを含み保存剤を含まないバッファー中で提供されます。

フォーマット：精製

-80°Cで受領日から1年間安定です。
取り扱いの推奨事項：受領時は、キャップを開ける前に、バイアルを遠心し、溶液を穏やかに混合してください。マイクロ遠心チューブに分注し、-80°Cで保存してください。凍結融解を繰り返さないでください。IgGが損傷され、製品性能に影響を与える可能性があります

ADPリボシル化PARP1およびPARP3リコンビナントタンパク質のウェスタンブロッティングで評価されています。

ウェスタンブロッティング：この試薬は、リコンビナントPARP3タンパク質のモノ（ADPR）、ならびにリコンビナントPARP1タンパク質のモノ（ADPR）およびポリ（ADPR）を検出しました（Lee Kraus, University of Texas Southwestern Medical Center）。

濃度：ロット固有のデータシートを参照してください。

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