抗O結合型N-アセチルグルコサミン抗体、クローンRL2

β-結合N-アセチルグルコサミン（β-GlcNAc）によるセリンまたはトレオニン残基のヒドロキシル部分を介したタンパク質の翻訳後修飾は、O-結合β-GlcNAcまたは単にO-GlcNAcと呼ばれます。O-GlcNAcは、すべての動植物の核細胞質画分に含まれる最も多い翻訳後修飾の一つです。O-GlcNAcは他のタイプのタンパク質糖化とは異なり、核画分と細胞質画分の中でのみ生じ、通常はさらに修飾されてより伸長した構造を形成することがありません。また、O-GlcNアシル化は高度に動的で可逆的なプロセスです。O-GlcNAcトランスフェラーゼ（OGT）は特定のセリンまたはトレオニン残基でO-GlcNAcをタンパク質に付着させ、O-GlcNAcaseはタンパク質からのO-GlcNAcの除去／加水分解を触媒します。実際に、O-GlcNアシル化とセリン／トレオニンリン酸化の間の活発な相互作用は、細胞シグナル伝達の調節において重要な役割を果たします。タウおよびRNAポリメラーゼII（Pol II）は、O-GlcNアシル化による修飾を受けることがよく知られる2つのタンパク質です。アルツハイマー病ヒト脳では、タウが広範囲にわたってリン酸化され、あまりO-GlcNアシル化されません。同様に、転写の伸長段階が始まると、ポリII CTDではO-GlcNAcが除去されてO-リン酸塩に入れ替わります。

O-GlcNアシル化タンパク質のサイズによって異なります。

ラットO-結合型N-アセチルグルコサミンに相当するラット肝核膜から精製した細孔複合体-ラミナ画分。

免疫細胞染色：4.0 µg/mLで使用、HeLa細胞でO-結合N-アセチルグルコサミンを検出できます。
免疫細胞染色：ジギトニン透過処理したHeLa細胞の核膜を免疫染色しましたが、核内部は免疫染色しませんでした。クローンRL2は、無傷の核膜がないTriton X-100透過処理したHeLa細胞の核内部のみを染色しました（Adam, S.A., et al. (1990).J. Cell Biol. 111(3):807-816）。
アフィニティー結合分析：125Iで放射性標識し、分離したラット肝核膜に対して結合特性が検討されました。（Snow, C.M., et al. (1987).J. Cell Biol. 104(5):1143-1156）。.
電子顕微鏡：分離したラット肝核膜においてO-GlcNAc免疫反応により局在が調べられました（Snow, C.M., et al. (1987).J. Cell Biol. 104(5):1143-1156）。
ウェスタンブロッティング：ラット肝臓の核膜調製物からO-GlcNAc化タンパク質を検出できました（Snow, C.M., et al. (1987).J. Cell Biol. 104(5):1143-1156; Holt, G.D., et al. (1987).J. Cell Biol. 104(5):1157-1164）。
免疫沈降：ラット肝臓の核膜の可溶化調製物からO-GlcNAc化タンパク質を免疫沈降できます。核膜調製物をガラクトシルトランスフェラーゼで前処理すると、クローンRL2による糖タンパク質の免疫沈降が阻害されました（Snow, C.M., et al. (1987).J. Cell Biol. 104(5):1143-1156; Holt, G.D., et al. (1987).J. Cell Biol. 104(5):1157-1164）。

抗O-結合型N-アセチルグルコサミン抗体クローンRL2はO-結合型N-アセチルグルコサミンに対する抗体であり、ウェスタンブロッティング、免疫細胞染色、アフィニティー結合分析、電子顕微鏡、免疫沈降で使用できます。

O-GlcNAc化タンパク質およびペプチド上のO-結合N-アセチルグルコサミン（O-GlcNAc）部分を特異的に認識します。遊離のGIcNAcに対してはほとんど反応せず、GalNacに対しても反応しません。O-GlcNAc化タンパク質をガラクトース転移酵素で処理すると、1-4結合を介してO-GlcNAcがガラクトース化され、クローンRL2による結合は完全に失われます（Holt, G.D., et al. (1987).J. Cell Biol. 104(5):1157-1164）。

標的となる構造は、種特異的ではありません。

フォーマット：精製

HeLa細胞ライセートでウェスタンブロッティングにより評価。

ウェスタンブロッティング：1.0 µg/mLで使用、10 µgのHeLa細胞ライセート中のO-結合N-アセチルグルコサミンを検出できます。

濃度：ロットに固有のデータシートを参照してください。