| Colonna | Colonna per HPLC Purospher® STAR RP-18 endcapped (5 μm) LiChroCART® 150-4,6 |
|---|---|
| Fase mobile | Metanolo/acqua 80:20 |
| Velocità di flusso | 1,0 ml/min |
| Rilevazione | UV 254 nm |
| Temperatura | 30 °C |
| Vol. di iniezione |
10 μl |
| Campione | 1. Uracile 2. butilbenzene 3. o-terfenil 4. Pentilbenzene 5. Trifenilene |
 |
Test di Tanaka |
Caratterizzazione cromatografica delle proprietà delle colonne
Il controllo delle proprietà fisiche e chimiche delle fasi stazionarie è importante. Tuttavia, soltanto una caratterizzazione cromatografica globale garantisce un livello di riproducibilità costantemente elevato. Per questo motivo, ricercatori di primo piano nell'ambito dell’HPLC hanno affrontato la caratterizzazione della selettività con approcci differenti.
Il test di Tanaka* è riconosciuto in tutto il mondo come lo standard industriale per la valutazione della selettività e delle prestazioni di tipi differenti di colonne per HPLC. Oltre a semplificare il confronto tra le colonne, questi parametri facilitano la selezione della colonna per HPLC più adatta per un particolare tipo di separazione.
Per descrivere capacità, idrofobicità, selettività sterica e proprietà silanofile si utilizza una serie di sette sostanze selezionate. I valori di questi parametri sono indicati sui sei assi di un esagono, che raffigurano in sintesi la qualità di un adsorbente.
Maggiore è la simmetria dell'esagono, più ampia è la sua superficie e dunque la fase stazionaria sarà più bilanciata nella somma delle sue proprietà cromatografiche.
* Prof. Tanaka, Istituto per la tecnologia di Kyoto, J. of Chrom. Sci. 27, 725, 1989
Parametri per la caratterizzazione degli adsorbenti HPLC di Purospher® secondo Tanaka
| Parametri | Proprietà della fase stazionaria | Fattori nella preparazione della fase stazionaria | |
|---|---|---|---|
| k (pentilbenzene) Metanolo 80% |
Capacità di ritenzione (A) |
Quantità di catene alchiliche | Superficie in silice Copertura in silice |
| k (pentilbenzene)/ k (butilbenzene) Metanolo 80% |
Idrofobicità (B) | Capacità idrofobica (selettività per il gruppo CH2) |
Copertura superficiale |
| k (trifenilene)/ k (o-terfenil) Metanolo 80% |
Selettività sterica (C) | Selettività sterica (forma) | Funzionalità silanica Copertura superficiale |
| k (caffeina)/k (fenolo) Metanolo 30% |
Capacità silanolica (D) | Capacità silanolica (contenuto e tipo di silanoli) | Silanoli residui Endcapping Copertura superficiale |
| k (benzilamina)/k (fenolo) Metanolo 30% / Tampone fosfato 70%, pH 7,6 |
Capacità di scambio ionico (E) | Capacità di scambio ionico a pH 7 |
Silanoli residui Siti attivi a pH 7 |
| k (benzilamina)/k (fenolo) Metanolo 30%/tampone fosfato 70%, pH 2,7 |
Capacità di scambio ionico (F) | Capacità di scambio ionico a pH 3 |
Siti attivi a pH 3 Trattamento della silice basica (impurezze metalliche) |
Test di Tanaka per Purospher® STAR RP-18 Endcapped
Tanaka 1: capacità di ritenzione, idrofobicità, selettività sterica
Il test Tanaka 1 descrive la capacità di ritenzione, l’idrofobicità e la selettività sterica delle fasi RP.
Tanaka 2: capacità silanolica
Il test Tanaka 2 (cromatogramma A) illustra le proprietà silanofile delle fasi stazionarie. Il cromatogramma B non fa parte del test Tanaka 2. Il test del fenolo/piridina misura le attività silanoliche.
Tanaka 3 e 4: capacità di scambio ionico
I risultati ottenuti dal test Tanaka 3 (a pH basso) mostrano se la disattivazione dei gruppi silanolici residui è completa. Il test Tanaka 4 (a pH alto) indica la completa assenza di metalli nell'adsorbente basico.
Risultati del test di Tanaka per Purospher® STAR RP-18 Endcapped
Nel confronto con altri marchi di colonne RP-18 endcapped “a elevata purezza”, Purospher® STAR RP-18 endcapped dimostra di possedere la migliore selettività globale, il che la rende la colonna di scelta per il successo delle separazioni HPLC.
| A. | K (pentilbenzene) | 9,59 |
| B. | α (pentil-/butilbenzene) | 1,51 |
| C. | α (trifenilene/o-terfenil) | 1,63 |
| D. | α (caffeina/fenolo) | 0,44 |
| E. | α (benzilamina/fenolo; pH 7,6) | 0,23 |
| F. | α (benzilamina/fenolo; pH 2,7) | 0,02 |
Risorse correlate
