Purospher® STAR RP-18 Endcapped per applicazioni LC-MS
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I picchi di massa "fantasma" rappresentano un problema di frequente riscontro nella LC-MS in gradiente. È impossibile stabilire se i picchi fantasma provengono da un composto non noto del campione, da un’impurezza della fase mobile o da lisciviazione della fase legata. Tuttavia, una procedura in tre fasi può aiutare a evitare picchi LC-MS spuri e garantire separazioni HPLC sempre prive di picchi fantasma. Questo semplice processo include la pulizia delle colonne e la scelta di solventi adatti per LC-MS. Queste fasi incrementano l'efficienza della ionizzazione migliorando così la sensibilità e la riproducibilità dei risultati LC-MS.
Semplice processo in 3 fasi per l'ottimizzazione delle prestazioni in LC-MS
- Sciacquare una colonna per 60 minuti con una specifica miscela di solventi per rimuovere le possibili tracce di impurità. Il solvente di lavaggio per LC-MS raccomandato è 2-propanolo con acido formico 0,1% a una velocità di flusso di 0,5 ml/min (per colonne con diametro interno di 3 mm).
- Per ridurre il segnale di fondo della LC-MS, utilizzare solventi di elevatissima purezza. Il solvente raccomandato è LiChrosolv® Hypergrade con specifiche particolari per la MS.
- Infine è necessario riequilibrare la colonna con la fase mobile. I risultati migliori si ottengono utilizzando prima dell'analisi due gradienti di solvente in bianco (senza iniezione del campione). In LC-MS le colonne per HPLC Purospher® STAR RP-18 endcapped producono segnali di fondo stabili e molto bassi, semplicemente con un precedente lavaggio con 2-propanolo/acido formico 0,1%.
Cromatogrammi ionici di “profeni” estratti in modalità ionica negativa separati su Purospher® STAR RP-18 Endcapped
La combinazione di solventi LiChrosolv® Acetonitrile Hypergrade e colonne Purospher® STAR RP-18 endcapped produce spettri MS privi di picchi fantasma per ketoprofene, fenoprofene e ibuprofene (100 ng).
Per saperne di più
Colonna
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Colonna per HPLC Purospher® STAR RP-18 endcapped (3 μm) LiChroCART® 55-2 |
Fase mobile A
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Acido acetico 0,1% in acetonitrile |
Fase mobile B
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Acido acetico 0,1% in acqua |
Gradiente
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Dal 25% al 50% di A in 3 min, quindi isocratico |
Velocità di flusso
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300 µl, senza suddivisione |
Rilevazione
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UV 220 nm, MS a trappola ionica |
Temperatura |
Ambiente |
Volume di iniezione
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1 µl |
Campione |
Ketoprofene, fenoprofene, ibuprofene; 0,1 µg/µl |
Condizioni per la MS |
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Ionizzazione |
ESI(-) |
Nebulizzatore |
36 psi |
Gas di essiccamento |
8,5 l/min |
Temperatura di essiccamento |
330 °C |
Ottimizzazione modalità smart |
Massa target 205 |
Controllo di carica ionica
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Target 50 000, max 50 ms |
Modalità di scansione |
Standard/normale |
Gamma di scansione |
50-600 m/z |
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