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Purospher® STAR RP-18 Endcapped per applicazioni LC-MS


Intensità del picco di base

I picchi di massa "fantasma" rappresentano un problema di frequente riscontro nella LC-MS in gradiente. È impossibile stabilire se i picchi fantasma provengono da un composto non noto del campione, da un’impurezza della fase mobile o da lisciviazione della fase legata. Tuttavia, una procedura in tre fasi può aiutare a evitare picchi LC-MS spuri e garantire separazioni HPLC sempre prive di picchi fantasma. Questo semplice processo include la pulizia delle colonne e la scelta di solventi adatti per LC-MS. Queste fasi incrementano l'efficienza della ionizzazione migliorando così la sensibilità e la riproducibilità dei risultati LC-MS.

Semplice processo in 3 fasi per l'ottimizzazione delle prestazioni in LC-MS

  1. Sciacquare una colonna per 60 minuti con una specifica miscela di solventi per rimuovere le possibili tracce di impurità. Il solvente di lavaggio per LC-MS raccomandato è 2-propanolo con acido formico 0,1% a una velocità di flusso di 0,5 ml/min (per colonne con diametro interno di 3 mm).
  2. Per ridurre il segnale di fondo della LC-MS, utilizzare solventi di elevatissima purezza. Il solvente raccomandato è LiChrosolv® Hypergrade con specifiche particolari per la MS.
  3. Infine è necessario riequilibrare la colonna con la fase mobile. I risultati migliori si ottengono utilizzando prima dell'analisi due gradienti di solvente in bianco (senza iniezione del campione). In LC-MS le colonne per HPLC Purospher® STAR RP-18 endcapped producono segnali di fondo stabili e molto bassi, semplicemente con un precedente lavaggio con 2-propanolo/acido formico 0,1%.

Cromatogrammi ionici di “profeni” estratti in modalità ionica negativa separati su Purospher® STAR RP-18 Endcapped

La combinazione di solventi LiChrosolv® Acetonitrile Hypergrade e colonne Purospher® STAR RP-18 endcapped produce spettri MS privi di picchi fantasma per ketoprofene, fenoprofene e ibuprofene (100 ng).

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Colonna
Colonna per HPLC Purospher® STAR RP-18 endcapped (3 μm) LiChroCART® 55-2
Fase mobile A
Acido acetico 0,1% in acetonitrile
Fase mobile B
Acido acetico 0,1% in acqua
Gradiente
Dal 25% al 50% di A in 3 min, quindi isocratico
Velocità di flusso
300 µl, senza suddivisione
Rilevazione
UV 220 nm, MS a trappola ionica
Temperatura Ambiente
Volume di iniezione
1 µl
Campione Ketoprofene, fenoprofene, ibuprofene; 0,1 µg/µl
Condizioni per la MS
Ionizzazione ESI(-)
Nebulizzatore 36 psi
Gas di essiccamento 8,5 l/min
Temperatura di essiccamento 330 °C
Ottimizzazione
modalità smart
Massa target 205
Controllo di carica ionica
Target 50 000, max 50 ms
Modalità di scansione Standard/normale
Gamma di scansione 50-600 m/z
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