| Colonna | Colonne per HPLC Purospher® RP-18 (5 µm) LiChroCART® 125-4 | |
|---|---|---|
| Fase mobile | Metanolo/acqua 55/45 (v/v) | |
| Velocità di flusso | 1,0 ml/min | |
| Temperatura | ambiente | |
| Rilevazione | UV 254 nm | |
| Campione | 1. Tiourea 2. Anilina 3. Fenolo 4. p-, m-, o-etilanilina 5. N,N-dimetilanilina 6. Etilbenzoato 7. Toluene 8. Etilbenzene |
a basico acido basico basico neutro neutro neutro |
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Test di Engelhardt |
Idrofobicità e attività silanoliche delle fasi stazionarie Purospher®
Il test di Engelhardt è stato eseguito su diverse fasi stazionarie Purospher® per verificarne le selettività. Questo test su 8 composti, messo a punto da Engelhardt et al.*, è diventato una delle procedure standard per valutare l’idrofobicità e l’attività silanolica degli impaccamenti delle colonne in fase inversa. Toluene ed etilbenzene dimostrano le proprietà idrofobiche, mentre fenolo ed etilbenzoato definiscono le interazioni polari neutre. Il comportamento decisivo nei confronti dei composti basici viene valutato con l'iniezione di 5 differenti aniline. In presenza di una buona soppressione dell'attività silanolica della fase stazionaria l'anilina viene eluita prima del fenolo con un’eccellente forma del picco, mentre gli isomeri geometrici dell’etilanilina vengono coeluiti.
* Engelhardt et al., Chromatographia 29, 59, 1990
Purospher® RP-18
In Purospher® RP-18, a causa dell’endcapping amminico con interazioni polari con gli analiti, potrebbe non verificarsi la coeluizione degli isomeri geometrici della (p-, m-, o-) etilanilina (4). L’eluizione di entrambe le aniline (2, 5) induce picchi simmetrici, indicando quindi l'eccellente idoneità di Purospher® RP-18 per la separazione di analiti fortemente basici.
Purospher® RP-18 endcapped
Non essendovi interazioni polari sulla superficie, Purospher® RP-18 endcapped mostra una coeluizione perfetta delle p-, m- e o-etilaniline (4). L’eluizione di entrambe le aniline (2, 5) induce picchi simmetrici, dimostrando l'eccellente idoneità per la separazione di analiti fortemente basici. L'elevato tempo di ritenzione dell’etilbenzene (8) indica l'idrofobicità della fase stazionaria.
Purospher® STAR RP-18 endcapped
Purospher® STAR RP-18 endcapped mostra una coeluizione perfetta delle p-, m- e o-etilaniline (4), che indica l'assenza di interazioni polari dovute all'attività silanolica sulla superficie. L’eluizione di entrambe le aniline (2, 5) è simmetrica, dimostrando l'eccellente idoneità per la separazione di composti fortemente basici. Purospher® STAR RP-18 endcapped mostra una selettività simile a quella di Purospher® RP-18 endcapped, ma con un intervallo di pH più esteso.
Purospher® RP-18 HC
Non essendovi endcapping della fase legata, Purospher® RP-18 HC mostra interazioni polari molto nette con i silanoli residui sulla superficie. L’eluizione dell'anilina e del fenolo (2,3) induce un unico picco, mentre i composti basici dimostrano un incremento della ritenzione ma una perdita delle prestazioni. Questa colonna è quindi idonea per la separazione di analiti polari, non basici, come gli esplosivi.
Purospher® STAR RP-8 Endcapped
Per la presenza di interazioni polari dovute al sottile strato di rivestimento idrofobico con brevi catene C8, Purospher® STAR RP-8 endcapped non mostra alcuna coeluizione delle p-, m- e o-etilaniline (4). L’eluizione delle aniline (2, 5) induce picchi simmetrici, dimostrando l'ottima idoneità per la separazione di composti fortemente basici. L’eluizione dell’etilbenzoato (6) e del toluene (7) induce un unico picco, come avviene tipicamente per le fasi C8.
Proprietà cromatografiche delle fasi stazionarie Purospher®
| Simmetria del picco di agenti complessanti | Interazioni polari | Selettività sterica | Selettività per il gruppo CH2 | Attività del gruppo silanolico | Idrofobicità | |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Purospher® RP-18 | +++ | ++ | +++ | +++ | ++ | + |
| Purospher® RP-18 endcapped | +++ | - | +++ | +++ | - | +++ |
| Purospher® STAR RP-18 endcapped | +++ | - | +++ | +++ | - | +++ |
| Purospher® STAR RP-8 endcapped | +++ | + | + | ++ | ++ | + |
| Purospher® RP-18 HC | +++ | ++ | +++ | +++ | + | ++ |
Risorse correlate
