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Les MAPmate™ suivants ne peuvent pas être utilisés ensemble : -des MAPmate™ qui nécessitent des tampons différents -des paires de MAPmate™ totaux et phospho-spécifiques, par ex. GSK3β total et GSK3β (Ser 9) -des MAPmate™ PanTyr et spécifiques d'un site, par ex. Récepteur Phospho-EGF et phospho-STAT1 (Tyr701) -Plus d'un phospho-MAPmate™ pour une seule cible (Akt, STAT3). -GAPDH et β-Tubuline ne peuvent pas être utilisés avec les kits ou les MAPmate™ contenant panTyr.
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96-Well Plate
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48-602MAG
Buffer Detection Kit for Magnetic Beads
1 Kit
Option de gain de place Nos clients qui commandent plusieurs kits peuvent choisir d'économiser de l'espace de stockage en éliminant l'emballage de chaque kit et de recevoir les composants de leur essai multiplex conditionnés sous poches en plastique pour un stockage plus compact.
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444248
Sigma-AldrichMMP-13, Proenzyme, His•Tag®, Human, Recombinant, S. frugiperda
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Description
Overview
Full-length recombinant, human MMP-13 fused to a His•Tag® sequence and expressed in S. frugiperda insect cells. This 452 amino acid proenzyme contains the N-terminal propeptide, the Ca2+- and Zn2+-binding catalytic domain, the hinge region, and the C-terminal hemopexin domain. Hydrolyzes collagen type II 5 to 6 times faster than collagens Type I and III. Exhibits high activity towards gelatin and degrades α1-antichymotrypsin and plasminogen activator inhibitor-2 (PAI-2).
Note: 1 mU = 1 milliunit.
Catalogue Number
444248
Brand Family
Calbiochem®
Synonyms
Collagenase-3
References
References
Herget, J., et al. 2003. Am. J. Physiol.285, 4199. Nagase, H. 1997. Biol. Chem.378, 151. Knäuper, V., et al. 1996. J. Biol. Chem. 271, 1544. Knauper, V., et al. 1996. J. Biol. Chem.271, 17124. Pei, D., and Weiss, S.J. 1996. J. Biol. Chem.271, 9135. Knight, C.G., et al. 1992. FEBS Lett.296, 263.
Product Information
Unit of Definition
One unit is defined as the amount of APMA-activated enzyme that will hydrolyze 1.0 µmol MCA-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH₂ (<a href = "/Products/ProductDisplay.asp→catNO=03-32-5032">Cat. No. 03-32-5032</a>) per min at 37°C, pH 7.5.
Form
Liquid
Formulation
In 150 mM NaCl, 50 mM Tris-HCl, 5 mM CaCl₂, pH 7.5.
MMP-13, Proenzyme, His•Tag®, Human, Recombinant, S. frugiperda Certificats d'analyse
Titre
Numéro de lot
444248
Références bibliographiques
Aperçu de la référence bibliographique
Herget, J., et al. 2003. Am. J. Physiol.285, 4199. Nagase, H. 1997. Biol. Chem.378, 151. Knäuper, V., et al. 1996. J. Biol. Chem. 271, 1544. Knauper, V., et al. 1996. J. Biol. Chem.271, 17124. Pei, D., and Weiss, S.J. 1996. J. Biol. Chem.271, 9135. Knight, C.G., et al. 1992. FEBS Lett.296, 263.
Fiche technique
Note that this data sheet is not lot-specific and is representative of the current specifications for this product. Please consult the vial label and the certificate of analysis for information on specific lots. Also note that shipping conditions may differ from storage conditions.
Revision
18-July-2007 RFH
Synonyms
Collagenase-3
Description
Full-length recombinant, human MMP-13 fused to a His•Tag® sequence and expressed in S. frugiperda insect cells. This 452 amino acid proenzyme contains an N-terminal propeptide which confers latency to the proenzyme, a Ca2+- and Zn2+- binding catalytic domain, a hinge region, and a C-terminal hemopexin domain. Hydrolyzes collagen type II 5-6 times faster than collagens type I and III. Exhibits high activity towards gelatin and degrades α1-antichymotrypsin and plasminogen activator inhibitor-2.
Form
Liquid
Formulation
In 150 mM NaCl, 50 mM Tris-HCl, 5 mM CaCl₂, pH 7.5.
Recommended reaction conditions
Organomercurial Activation ProtocolThis protocol is provided only as a general guide. Researchers should standardize this assay for their own specific needs and should consult published literature. The following protocol is from Stricklin, et al., which describes the use of p-aminophenylmercuric acetate (APMA) to activate pro-MMP. This protocol is also adaptable to other types of organomercurals, such as p-(hydroxymercuric) benzoate (PHMB), phenylmercuric chloride (PMC), or mersalyl.
1. Prepare a 10-50 mM stock solution of APMA (or other organomercurial compound) in 0.1 M NaOH just prior to use. Although not absolutely necessary, the stock solution may be adjusted to pH 11 with 5 N HCl (see Marcy, A.I., et al.).
2. To initiate the activation mix the proenzyme solution with the APMA solution at a 10:1 volume ratio (MMP:APMA). If a higher concentration of APMA is desired, increase the concentration of the stock solution. Do not exceed the 10:1 ratio, as this could result in significant changes in pH.
3. Incubate the mixture at 37°C for 2-3 h. It is recommended that an analytical run be conducted first to determine the optimal incubation time. For example, a small-scale experiment with a fixed concentration of pro-MMP and organomercurial would be incubated as described above. Remove aliquots of the sample at various time points during the incubation. Stop the reaction by the addition of SDS-PAGE sample buffer (e.g., 10 µl 2X sample buffer to 10 µl aliquot) and heat the samples to 95°C. The progress of activation can be monitored qualitatively by analyzing the aliquots on a 12% SDS-PAGE gel.
4. The activated MMP can be used without removing the APMA from the mixture. Please refer to Marcy, A.I., et al. for removal of organomercurials by gel filtration.
Purity
≥90% by SDS-PAGE
Specific activity
≥50 mU/mg protein
Unit definition
One unit is defined as the amount of APMA-activated enzyme that will hydrolyze 1.0 µmol MCA-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH₂ (Cat. No. 03-32-5032) per min at 37°C, pH 7.5.
Storage
Avoid freeze/thaw
≤ -70°C
Do Not Freeze
Ok to freeze
Special Instructions
Following initial thaw, aliquot and freeze (-70°C).
Toxicity
Standard Handling
References
Herget, J., et al. 2003. Am. J. Physiol.285, 4199. Nagase, H. 1997. Biol. Chem.378, 151. Knäuper, V., et al. 1996. J. Biol. Chem. 271, 1544. Knauper, V., et al. 1996. J. Biol. Chem.271, 17124. Pei, D., and Weiss, S.J. 1996. J. Biol. Chem.271, 9135. Knight, C.G., et al. 1992. FEBS Lett.296, 263.