Unidades Amicon® Ultra-4 para filtración con centrífuga
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Referencias bibliográficas
| Visión general referencias | Aplicación |
|---|---|
| Modification of Allergenicity and immunogenicity of formate dehydrogenase by conjugation with linear mono methoxy poly ethylene glycol: Improvement in detoxification of formate in methanol poisoning Muthuvel A., Rajamani R., Senthilvelan M., Manikandan s., Sheeladevi R. Clinica Chimica acta 374 (2006) 122-128 2005 | Protein Purification |
| Simultaneous reduction and alkylation of protein disulfides in a centrifugal ultrafiltration device prior to two-dimensional gel electrophoresis. Smejkal GB, Li C, Robinson MH, Lazarev AV, Lawrence NP, Chernokalskaya E. J Proteome Res. 2006 Apr;5(4):983-7. 2005 | Protein Concentration |
| Measurement of Pro-C-Type Natriuretic Peptide in Plasma Nielsen, S.J., Rehfeld, J.F., Pedersen, F., Kastrup, J., Videback, R., Goetze, J.P. Clinical Chemistry 51 (2005): 2173-2716 2004 | |
| Comparative Proteomic Analysis of Intra- and Interindividual Variation in Human Cerebrospinal Fluid Hu, Y., Malone, J.P., Fagan, A.M., Townsend, R.R., Holtzmann, D.M Molecular & Cellular Proteomics 4.12 (2005): 2000-2009 2004 | |
| Ultrafiltration for proteomic sample preparation E. Chernokalskaya, S. Gutierrez, A.M. Pit, J. T. Leonard Electrophoresis, 25: 2461-2468 2004 | Sample Prep |
Preguntas frecuentes
| Pregunta | Respuesta | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Amicon Ultra units are offered in what volumes? | Amicon Ultra units are available in 0.5 mL, 4mL & 15ml volumes. | ||||||||||||
| What is the recommended rotor for Amicon Ultra units? | Any rotor capable of accommodating 22.7 cm in diameter and 124 mm length centrifuge tubes for the Amicon Ultra-4 and 35 mm in diameter and 121 mm in length for the Amicon Ultra-15 can be used for Amicon Ultra units. | ||||||||||||
| How should I select the appropriate Molecular Weight Cutoff (MWCO) for Amicon Ultra? | Select a Molecular Weight Cutoff that is 2x smaller that the Molecular Weight (MW) of the solute of interest. | ||||||||||||
| Which membranes are available in Amicon Ultra units? | Amicon Ultra units are only available with Ultracel regenerated cellulose material. This high recovery/low binding membrane is offered in 3,000, 10,000, 30,000, 50,000 & 100,000 MWCO. | ||||||||||||
| Can the Amicon Ultra be spun to dryness? | No, the Amicon Ultra has a built in deadstop. | ||||||||||||
| Can the Amicon Ultra be used with nucleic acids? | Yes, Amicon Ultra units have been evaluated for use with Genomic and PCR fragments. The 30 kDa MWCO provides the best balance between recovery and spin time. Protocols related to Genomic and PCR fragments can be found in the user guide. | ||||||||||||
| What is the maximum sample volume for Amicon Ultra? |
|
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| What is the maximum centrifugal force I can spin Amicon Ultra-4 & Amicon Ultra-15? |
|
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| What is the chemical compatibility of Amicon Ultra? | Amicon Ultra units are intended for use with biological fluids and aqueous solutions. Please refer to the user guide, catalogue, or contact Technical Support. | ||||||||||||
| Can Amicon Ultra units be sterilized with ethanol? | Amicon Ultra is compatible with 70% Ethanol, but we have not done any studies to test for sterilization. |
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| Life Science Research > Protein Sample Preparation > Protein Concentration & Dialysis > Sample Prep Centrifugal Filter Units |
- Membrana Ultracel de celulosa regenerada y alta recuperación en diferentes cortes de peso molecular
- Recuperación alta de retenido >90%
- La membrana vertical reduce la polarización en la concentración para tiempos de centrifugación ultra-rápidos (en sólo 5 minutos)
- Membrana sellada con calor que minimiza los extraíbles finales
- Análisis de integridad al 100% para un rendimiento fiable
- Monitorización conveniente de la muestra con carcasa translúcida y graduaciones de volumen
- Acceso directo del pipeteador a las muestras que elimina el paso de procesado para recuperar el concentrado
- Altos factores de concentración 80–100x
Aplicaciones
- Concentración de muestras biológicas que contienen antígenos, anticuerpos, enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos
- Purificacion de compuestos macromoleculares presentes en los extractos de cultivos de tejido o lisados celulares
- Concentración de proteínas diluidas o pre-purificadas de los eluyentes de la columna
- Desalado y cambio de tampones
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Tiempos típicos de centrifugación según el volumen de filtrado
)
Condiciones de centrifugación: 4.000 g con rotor de cabezal basculante a 25 °C, 4 ml de muestra.
3.000, 10.000: Citocromo c (0,25 mg/ml);
30.000, 50.000: BSA (1 mg/ml);
100.000: IgG (1 mg/ml).
Recuperación típica de proteínas
| Membrana NMWL, Da |
Soluto proteico | Volumen de retenido proteico, ml |
Recuperación de retenido proteico, % |
| 3.000 | Citocromo c, 12.400 Da (0,25 mg/ml) |
0,19 | 98,7 |
| 10.000 | Citocromo c, 12.400 Da (0,25 mg/ml) |
0,20 | 95 |
| 30.000 | BSA, 67.000 Da (1 mg/ml) |
0,20 | 95 |
| 50.000 | BSA, 67.000 Da (1 mg/ml) |
0,08 | 94 |
| 100.000 | IgG, 156.000 Da (1 mg/ml) |
0,34 | 91 |
| Volumen inicial de 4 ml en un rotor de ángulo fijo a 7.500 g a 25 °C. Tiempos de centrifugación: 3.000 (30 min); 10.000 y 30.000 (10 min); 50.000 (5 min); 100.000 (15 min). | |||
| Volúmenes | |
| Volumen inicial máximo de muestra, ml* | 4 mL |
| Volumen final típico de concentrado, µl | 50 µL |
| Fuerza centrífuga | Rotor de cabezal basculante: 4.000 g; Rotor de ángulo fijo: 7.500 g para 3.000, 10.000, 30.000 y 50.000; 5.000 g para 100.000 |
| Materiales | |
| Membrana | Ultracel de celulosa regenerada |
| Dispositivo | Housing: Styrene/butadiene Tubo: Polipropileno Tapa: Polietileno |
| Dimensiones | |
| Área activa de membrana, cm2 | 3 cm² |
| Filtrate tube or vial (centrifuge tube) | |
| Diámetro | 17.3 mm |
| Longitud (with cap and device) | 124 mm (4.88 in.) |
| Filter unit | |
| Diameter, mm | 17.2 |
| Length, mm | 73.4 |
| *Excepto en el rotor de ángulo fijo de 23°: 3,5 ml | |