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Kits de señalización celular y MAPmates™
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No deben combinarse los siguientes MAPmates™: -MAPmates™ que requieren un tampón de ensayo diferente. -Pares MAPmate™ fosfoespecíficos y totales, por ejemplo, GSK3β y GSK3β (Ser 9). -MAPmates™ con panTyr y específicos de sitio; por ejemplo, receptor del fosfo-EGF y fosfo-STAT1 (Tyr701). -Más de 1 fosfo-MAPmate™ para una sola diana (Akt, STAT3). -La GAPDH y la β-tubulina no pueden combinarse con kits o MAPmates™ que contengan panTyr.
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96-Well Plate
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48-602MAG
Buffer Detection Kit for Magnetic Beads
1 Kit
Opción para ahorrar espacio Los clientes que adquieran múltiples kits pueden optar por ahorrar espacio de almacenamiento retirando el embalaje del kit y recibiendo los componentes de sus ensayos multiplex en bolsas de plástico para un almacenamiento más compacto.
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362300
Sigma-AldrichN-Glycosidase F, Chryseobacterium meningosepticum, Recombinant, E. coli
Recombinant, Chryseobacterium meningosepticum N-Glycosidase F expressed in E. coli. This enzyme from Chryseobacterium (formerly Flavobacterium) meningosepticum catalyzes the hydrolysis of N-glycans from high mannose, hybrid and complex glycopeptides, and from glycoproteins generating asparagine-linked oligosaccharides.
Note: 1 mU = 1 milliunit.
Catalogue Number
362300
Brand Family
Calbiochem®
Synonyms
Peptide-N-glycosidase F, Peptide-N⁴-(acetyl-β-glucosaminyl)-asparagine Amidase, PNGase F, Glycopeptidase F
References
References
Fan, J.-Q., and Lee, Y.C. 1997. J. Biol. Chem. 272, 27058. Altmann, F., et al. 1995. Glycoconj. J. 12, 84.
Product Information
CAS number
83534-39-8
Unit of Definition
One unit is defined as the amount of enzyme that will completely catalyze the release of N-linked oligosaccharides from 1 µmol denatured ribonuclease in 1 min at 37°C, pH 7.5.
EC number
3.5.1.52
Form
Liquid
Formulation
Enzyme supplied in 50 mM NaCl, 20 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 7.5.
N-Glycosidase F, Chryseobacterium meningosepticum, Recombinant, E. coli Certificados de análisis
Cargo
Número de lote
362300
Referencias bibliográficas
Visión general referencias
Fan, J.-Q., and Lee, Y.C. 1997. J. Biol. Chem. 272, 27058. Altmann, F., et al. 1995. Glycoconj. J. 12, 84.
Ficha técnica
Note that this data sheet is not lot-specific and is representative of the current specifications for this product. Please consult the vial label and the certificate of analysis for information on specific lots. Also note that shipping conditions may differ from storage conditions.
Revision
19-March-2019 JSW
Synonyms
Peptide-N-glycosidase F, Peptide-N⁴-(acetyl-β-glucosaminyl)-asparagine Amidase, PNGase F, Glycopeptidase F
Description
Recombinant, Chryseobacterium meningosepticum N-Glycosidase F expressed in E. coli. This enzyme from Chryseobacterium (formerly Flavobacterium) meningosepticum catalyzes the hydrolysis of N-glycans from high mannose, hybrid and complex glycopeptides, and from glycoproteins generating asparagine-linked oligosaccharides. Supplied with a series of buffers.
Form
Liquid
Formulation
Enzyme supplied in 50 mM NaCl, 20 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 7.5.
Recommended reaction conditions
• Reaction Buffer (Component No. KP31859-1EA): 1 vial, 1 ml, 100 mM sodium phosphate, 0.1% sodium azide, pH 7.5, supplied as a 5X solution • Denaturation Solution (Component No. KP31860-1EA): 1 vial, 200 µl, 2% SDS, 1 M β-mercaptoethanol • Detergent Solution (Component No. KP31861-1EA): 1 vial, 200 µl, 15% NP-40 solution • Tris Reaction Buffer (Component No. KP31865-1EA): 1 vial, 1 ml, 50 mM Tris-HCl, pH 8.0 • N-Glycosidase F, Chryseobacterium meningosepticum, Recombinant, E. coli (Component No. KP31858-100MIU): 1 vial, 100 mU
Note: Tris Reaction Buffer has been included as an alternative reaction buffer because phosphate buffers should be avoided if mass spectrometry is used in downstream analysis.
Procedure for Deglycosylation (Denaturing Conditions)
The amount of enzyme required for deglycosylation depends on the substrate used, the incubation conditions, and the exact application. This protocol is provided only as a guide. Assay conditions should be adjusted as required for individual applications.
1. Prepare 50 to 500 µg glycoprotein solution in 45 µl 1X Reaction. Add 2.5 µl Denaturation Solution. 2. Denature glycoprotein by heating at 100°C for 5 min. Allow mixture to cool. 3. Add 2.5 µl Detergent Solution. 4. Add 2 µl N-Glycosidase to the reaction mixture and incubate for 2 h to overnight at 37°C.
CAS number
83534-39-8
EC number
3.5.1.52
Contaminants
β-N-acetylhexosaminidase, α-fucosidase, β-galactosidase, α- and β-mannosidase, proteases: none detected
Specific activity
≥10 units/mg protein
Unit definition
One unit is defined as the amount of enzyme that will completely catalyze the release of N-linked oligosaccharides from 1 µmol denatured ribonuclease in 1 min at 37°C, pH 7.5.
Storage
Avoid freeze/thaw
-20°C
Do Not Freeze
Ok to freeze
Special Instructions
Following initial thaw, aliquot and freeze (-20°C).
Toxicity
Standard Handling
References
Fan, J.-Q., and Lee, Y.C. 1997. J. Biol. Chem. 272, 27058. Altmann, F., et al. 1995. Glycoconj. J. 12, 84.
