Chromolith® Prep

Vergleich mit Partikelmaterial

Die Selektivität der monolithischen Chromolith® Prep RP-18-Säulen mit Endcapping ist vergleichbar mit üblichen RP-18-Umkehrphase-Säulen mit Endcapping. Dank ihrer hohen Geschwindigkeit und großen Effizienz sind diese präparativen Säulen jedoch hervorragend geeignet für die Trennung unpolarer basischer und saurer Verbindungen und Peptide.

In den meisten Fällen können bestehende Verfahren zur Anwendung von Partikelsäulen problemlos auf Chromolith® Prep-Säulen übertragen werden. Für einige Anwendungen lohnt es sich jedoch, das Verfahren zu optimieren, um das volle Potenzial der verbesserten Technologie auszuschöpfen.

Vergleich von Chromolith® Prep RP-18, 100–25 mm mit Endcapping mit Partikelmaterial: Trennung von Oximderivaten

Der Vergleich von Chromolith® Prep RP-18 mit Endcapping mit einer Partikelsäule mit Endcapping (Purospher RP-18, 250–50 mm) zeigt, dass beide Trennungen unter denselben chromatographischen Bedingungen eine ähnliche Auflösung erzielen. Die Chromolith® Prep RP-18-Säule mit Endcapping weist jedoch eine bessere Selektivität auf als die Purospher RP-18 mit Endcapping. Das wird deutlich anhand der Auflösung des zusätzlichen Isomerenpeaks bei 7 Minuten.

Packvorrichtung NW 50 (250–50), gefüllt mit Purospher RP-18 mit Endcapping, 10 µm

Säule	Packvorrichtung NW 50 (250–50), gefüllt mit Purospher RP-18 mit Endcapping, 10 µm
Mobile Phase	A: Wasser + 0,05 % TFA B: Acetonitril + 0,05 % TFA
Gradient	linear in 30 min bis zu 100 % B
Flussrate	100 ml/min
Detektion	UV 210 nm
Probe	125 mg Oximderivate in 500 µl Acetonitril

Chromolith® Prep RP-18, 100–25 mm, mit Endcapping

Säule	Chromolith® Prep RP-18, 100–25 mm, mit Endcapping
Mobile Phase	A: Wasser + 0,05 % TFA B: Acetonitril + 0,05 % TFA
Gradient	linear in 11 min bis zu 100 % B
Flussrate	100 ml/min
Nachweis	UV 210 nm
Probe	125 mg Oximderivate in 500 µl Acetonitril

Trennung von Hirudin (Filtrat von Rohextrakt)

Ohne jegliche Probenvorbereitung wurde die rohe Probe direkt auf die Chromolith® Prep RP-18-Säule mit Endcapping injiziert. Die Trennung dauerte nur 5 Minuten, und das Zielprodukt konnte erfolgreich aus den Verunreinigungen isoliert werden.

Chromolith® Prep RP-18, 100–25 mm, mit Endcapping

Säule	Chromolith® Prep RP-18, 100–25 mm, mit Endcapping
Mobile Phase	B: Wasser + 0,1% Ameisensäure B: 100% Acetonitrile
Gradient	Zeit (min)	%A	%B
	0	90	10
	10	70	30
	10,1	90	10
Flussrate	60 ml/min
Detektion	UV 254 nm
Probe	23 mg Hirudin (Filtrat von Rohextrakt) injiziert in 5 ml Lösung

Trennung von Dihydropyridinen (Nifedipin, Nimodipin und Nisoldipin)

Mit der monolithischen Kieselgelstab-Technologie der Chromolith® Prep RP-18-Säulen mit Endcapping ist es möglich, Trennungen deutlich zu beschleunigen und gleichzeitig den Gegendruck zu reduzieren.

Chromolith® Prep RP-18, 100–25 mm, mit Endcapping

Säule	Chromolith® Prep RP-18, 100–25 mm, mit Endcapping
Mobile Phase	A: Wasser B. Acetonitril
Gradient	Zeit (min)	%A	%B
	0	80	20
	8	20	80
	8,1	80	20
Flussrate	10 ml/min
Detektion	UV 224 nm
Probe	90 mg Gemisch aus Nifedipin, Nimodipin und Nisoldipin

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