Purospher® STAR RP-18-Säulen mit Endcapping für LC/MS-Anwendungen

„Geisterpeaks“ stellen bei der LC/MS-Gradientenelution häufig eine Herausforderung dar. Es ist unmöglich festzustellen, ob Geisterpeaks von einer unbekannten Verbindung in der Probe, von einer Unreinheit in der mobilen Phase oder aber von einer aus der gebundenen Phase ausgelaugten Substanz herrühren. Ein 3-stufiges Verfahren kann jedoch dazu beitragen, störende LC/MS-Peaks zu vermeiden und konsistente, Geisterpeak-freie HPLC-Trennungen sicherzustellen. Dieses einfache Verfahren umfasst eine Reinigung der Säulen und die Wahl geeigneter Lösungsmittel für die LC/MS. Durch diese Schritte wird die Ionisierungseffizienz gesteigert und in der Folge die Empfindlichkeit und Reproduzierbarkeit der LC/MS-Ergebnisse verbessert.

Einfaches, 3-stufiges Verfahren zur Leistungsoptimierung bei LC/MS-Anwendungen

1. Spülen Sie die Säule 60 Minuten lang mit einem speziellen Lösungsmittelgemisch, um eventuell vorhandene Spurenverunreinigungen zu entfernen. Die empfohlene LC/MS-Waschlösung ist 2-Propanol mit 0,1 % Ameisensäure, bei einer Flussrate von 0,5 ml/min (für 3-mm-ID-Säulen).
2. Um das LC/MS-Hintergrundsignal zu reduzieren, verwenden Sie nur extrem hochreine Lösungsmittel. Das hierfür empfohlene Lösungsmittel ist LiChrosolv® Hypergrade mit speziellen MS-Spezifikationen.
3. Schließlich muss die Säule erneut mit der mobilen Phase äquilibriert werden. Beste Ergebnisse erzielt man, wenn man vor der Analyse zwei Leergradienten (ohne Probeninjektion) durchlaufen lässt. Purospher® STAR RP-18-HPLC-Säulen mit Endcapping produzieren in der LC/MS nach einfachem Waschen mit 2-Propanol/0,1%iger Ameisensäure sehr geringe und stabile Hintergrundsignale.

Auszug eines Ionenchromatogramms von „Profenen“ im Negativ-Ionen-Modus, getrennt mit Purospher® STAR RP-18 mit Endcapping

Die Kombination aus LiChrosolv® Acetonitril Hypergrade-Lösungsmitteln und Purospher® STAR RP-18-Säulen mit Endcapping zeigt für Ketoprofen, Fenoprofen und Ibuprofen (100 ng) Geisterpeak-freie MS-Spektren.

Weitere Informationen

Säule	Purospher® STAR RP-18 mit Endcapping (3 µm) LiChroCART® 55-2 HPLC-Säule
Mobile Phase A	0,1 % Essigsäure in Acetonitril
Mobile Phase B	0,1 % Essigsäure in Wasser
Gradient	von 25 % A bis 50 % A in 3 Min., dann isokratisch
Flussrate	300 µl, ohne Split
Detektion	UV 220 nm, Ionenfallen-MS
Temperatur	Umgebungstemperatur
Injektionsvolumen	1 µl
Probe	Ketoprofen, Fenoprofen, Ibuprofen; 0,1 µg/µl
MS-Bedingungen
Ionisierung	ESI(-)
Vernebler	36 psi
Trockengas	8,5 l/min
Trockentemperatur	330 °C
Smart-Modus Optimierung	Sollmasse 205
Steuerung der Ionenladung	Soll 50 000, max. 50 ms
Scanmodus	Standard/Normal
Scanbereich	50-600 m/z